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葡萄组织培养育苗


一、葡萄嫩梢采集与消毒
将大树或扦插苗长出5-7片叶的嫩梢，取5-10厘米长，去掉幼叶。用自来水冲洗3-5分钟，在70％酒精中浸泡30-40秒钟，用蒸馏水冲洗2-3次，再放入0.5％氯化汞溶液中消毒7一10分钟，最后用无菌水冲洗5-6次后备用。



二、培养基制作与筛选
(一)茎尖培养 方1 1／2MS培养基 6-苄基嘌呤(6-BA)0.5一lppm个荼乙酸(NAA)0.01ppm 水解乳蛋白(LH)100ppm 蔗糖2％ 琼脂0.6％配制，氢离子浓度调到1585纳摩／升[pH5.8)。在98.06千帕的压力下，高压灭菌20分钟，冷凉待用。山东酿酒葡萄研究所用此方对白羽、红香蕉、白友谊、雷司令等品种茎尖培养成活率达83.5％以上。
方2 1／2MS培养基 赤霉素(GA)0.1ppm 吲哚乙酸(1BA)0.59pm 6-节基嘻吟lppm 激动素(KT)0.5ppm 硫酸腺嘌呤(Ade)4ppm 琼脂0.6％ 蔗糖0.2％的培养基，对康拜尔芽变(康太)成活较好(辽宁省农科院植保所)。

(二)茎叶分化培养 方1 1／2MS培养基 赤霉素1ppm 吲哚丁酸0.5ppm 6-节基膘吟1ppm 蔗糖2％ 琼脂0.6％，氢离子浓度调到1000纳摩／升(pH6.0)。在98.06千帕高压下灭菌20分钟后备用。辽宁省农业科学院植保所对贝达、红富土、黑奥林、巨峰品种族种成活率达90％以上。
方2 用B5大量元素培养基 MS培养基其他元素 吲哚乙酸(1AA)0.01-0.1ppm 6-苄基嘌呤0.02-0.59pm 腺嘌呤(A)2；ppm或水解乳蛋白1000ppm 蔗糖2％-3％ 琼脂0.7％，氢离子浓度630.9-1585纳摩／升(pH5.8-6.2)，配好后装入三角瓶中，用两层硫酸纸封口，在98.06-117.67千帕的高压锅中灭菌20分钟，冷凉待用。河南省园艺所用此配方对京早晶品种接种成活效果较好。



(三)幼根分化培养 方1 用Bs大量元素培养基 蔗糖4％ 吲哚乙酸1ppm 6-苄基嘌呤0.08ppm 琼脂7％，氢离子浓度1000纳摩／升(pH6)，经高压灭菌20分钟，冷凉备用。辽宁省农业科学院植保所用此配方对红富士、黑奥林、巨峰等品种茎尖培养的单芽段，插入灭菌后的三角瓶培养基中，芽痕**培养基面3.5毫米，每瓶插入1-3个茎段，插后在黑暗中培养48小时；再转入间歇光照(两支40瓦日光灯下，每天光照10小时)培养，温度保持在23-28℃，20天后幼根平均长分别为99.0，86.3，78.0毫米。
方2 用1／2MS培养基 蔗糖4％ 吲哚乙酸0.4ppm 6-苄基嘌呤0.06ppm 琼脂7％，氢离子浓度1000纳摩／升(pH6)，经过高压灭菌后接种贝达、红宫土、黑奥林、臣蜂，20天后幼根平均长分别为94.0，36.5，16.8，50.8毫米。此培养基对贝达繁殖有较好效果(辽宁省农科院植保所)。



三、接种(茎段试管培养) 在**净工作台上，将彻底消毒过的备用嫩枝剪截2厘米核的单芽茎段，将其下部插入灭菌后的试管培养基中，芽痕**培养基面3-5毫米，每管插1-3个茎段，在黑暗处培养48小时，再转入间歇光照(两支40瓦日光灯下，每天照10个小时)培养，温度保持在25-28℃，以后光照时间每天可延长12-14小时，光照强度为2000-2500勒。



四、继代培养 将试管苗剪成带叶单芽段，不必消毒，插人培养基中，一般10一15天开始生根，30-35天可长成5.6片叶的小苗，在适宜条件下，1年可繁殖数万株试管苗。



五、炼苗移栽 试管苗长成后移到温室或塑料大绷里，在自然光照下炼苗。要求温度在20-25℃，经两周后将试管塞揭开，使之接受自然光照、温度、湿度锻炼4-5天。用镊子夹叶柄将小苗从培养基中取出，洗去培养基残留物，直接栽入温室或大棚中的小拱棚里的砂壤土或粗砂里，浇透底水。棚内湿度保持在90％左右。10厘米下的地温应稳定在15℃左右，光照为4000-5000勒。15-20天后见幼叶变绿时，即可移植到大田，成活率达80％以上。如棚内温度过高，要通风和盖苇帘遮荫降温，喷洒凉水，提高棚内空气湿度和土壤湿度，以保持炼壮苗的适宜条件。

葡萄扦插苗的种植管理
葡萄绿枝扦插成活率较高，如加强管理，一般可达85％以上。所以进行葡萄绿枝扦插育苗，是一种快速繁殖葡萄苗的好方法。


1.苗床准备选择土质好、肥力高的土地作育苗地，精细整理，建成1.2米宽的小畦，四边开好排水沟。


2.插条采集于5－7月选取发育较充实的绿枝条，剪成20－25厘米长的枝段；上部保留2片叶，其余的去掉叶片，留下叶柄。剪好后，将枝条置入清水中浸泡1－2小时，让其充分吸水。


3.扦插 插前枝条用100毫克／升的萘乙酸蘸根，然后按30×25厘米的行株距将枝条同向斜插入土中，入土三分之二，上端露出三分之一，插后立即浇透水。


4.插后管理 插后立即在畦上搭遮阳棚，一般30天左右插条即可生根、发芽。发芽后去掉遮阳棚，对成活枝条只保留1个壮芽，并酌情摘心和去副梢。生根发芽前要保持土壤水分充足，并注意防治病虫害。

葡萄扦插繁殖法


扦插繁殖就是直接利用葡萄枝蔓进行扦插培育苗木。根据枝条类型不同，扦插育苗可以分为硬枝扦插和绿枝扦插两生产上常用的是硬枝扦插。


(一)扦插生根的原理 葡萄枝蔓的节或节间都能生根，这种根叫不定根。葡萄枝蔓上发生不定根是由枝蔓皮层下面的与髓射线交接部分的中轴鞘细胞分裂而成的，而不是从愈合组织上产生的，所以在扦插育苗的实践中，常常可以见到葡条基部并末长出愈合组织，却在节间或节的部位发出了虽然愈合组织与不定根的产生没有直接的关系，但愈合组形成对于防止病菌侵入、保护剪口不腐烂、营养物质不流失有重要的作用，且为发根创造了条件。
葡萄枝蔓的节上生根较多，这时因为节的横隔膜内储藏的营养物质较多，而相对无横隔膜节间生根就较差。从枝龄上看，一年生枝条和嫩枝生根较好，而多年生蔓生根较差。
葡萄枝蔓的节间不能产生不定芽，所以扦插条必须要有一个饱满的芽葡萄的根不能产生不定芽，因此葡萄不能用根插。
葡萄的枝蔓在其形态*抽生新梢，在其形态下端抽生新根，这种现象称为“极性”，扦插时要特别注意不能倒插。
葡萄不同种类再生不定根的能力不一，欧洲种葡萄和美洲种葡萄比山葡萄、圆叶葡萄容易发根，同一种类的不同品种间扦插生根难易也互不相同，如巨峰系品种中，藤捻就是一个较难扦插生根的品种。
葡萄枝蔓储藏营养物质的多少与生根有密切的关系。在营养物质中碳水化合物对发根有重要的作用(试验证明葡萄插条中淀粉含量高时发根好)，其次氮素化合物也是发根必不可少的营养物质。适量的氮素营养有利于插条生根，所以枝条充分老熟、健壮是生根良好的首要条件。

(二)插条的采集和储藏 插条采集应在已经结果，而且品种特征**的优良植株(母树)上进行采集。而不应在一些表现不良、病虫为害严重和尚未结果的幼树上采集插条，以防造成苗木质量变劣和导致品种退化。
插条的采集一般结合冬季修剪同时进行，选发育充实、成好、节间短、色泽正常、芽眼饱满、无病虫为害的一年生枝作为插条，剪成7-8节长的枝段(50厘米左右)，每50-100条捆成1捆，并标明品种名称和采集地点，放于储藏沟中沙藏。储藏沟设在地势高燥的背阴处，沟深60-80厘米，长度和宽度依储藏枝条数量而定。储藏前先在沟底铺一层厚10-15厘米的湿沙，插条平放或立放均可，但应一层枝条撒一层沙，以减轻枝条呼吸发热。如果没有沙子也可用土，土的湿度为10％左右，捆与捆之间用细土填充。摆放插条的层数以3层为宜，过多时不便于检查管理，也易造成发热霉烂。条中间每隔2米左右竖一直立的草捆，以利上下通气。枝条摆好后，较上面可覆一层草秸，最后再盖上20-30厘米厚的土，东北、华北寒冷地区覆土厚还要适当增加。插条储藏期应注意经常检查，使沙藏沟内温度保持在1℃左右，一般不应**5℃，或低于-3℃。温度过高枝条呼吸增强，消耗养增多，且易生霉；温度太低芽眼易受冻害。储藏沟内湿度也合适，若发现湿度过大、枝条发霉时，要及时翻晾通风，重储藏。

2．葡萄快速繁殖法
(1)葡萄塑料营养袋快速育苗法 育苗前先用宽19厘米、长16厘米塑料薄膜对粘制成高16厘米、直径约6厘米的塑料袋，也可用市面出售的相应规格的塑料袋，袋底剪一个直径1厘米的小孔或剪于袋底的2个角，以利排水。同时，用土和过筛后的细沙及腐熟的厩肥按沙：土：肥＝2：1：1的比例配制成营养土。沙的比例不能太小，以防袋内土壤部重影响生根。
塑料营养袋育苗可在温室、火炕或阳畦中进行，如果用阳畦育苗，将塑料袋盛满营养土，使袋内土面离袋口约l厘米左右，然后将营养袋整齐地排列在阳畦中。一般1平方米阳畦可摆放400个营养袋。扦插时将储藏的插条剪成芽段，粗壮的枝条可剪成单芽插条，较细的枝条可剪成双芽插条，在芽眼上方1厘米处平剪，在芽下留3-5厘米斜剪(双芽扦插时在靠近*二芽下方斜剪，剪成马耳状)。将剪好的芽段用催根药剂处理后，直插在已摆好的营养袋，插条的**芽与袋内土面相平。扦插完后，灌1次透水，同时在阳畦上架设拱形支架，上盖塑料薄膜，晴天将薄膜揭开，进行通风，晚上盖严，使畦内白天的温度保持在20℃以上，而不**过30℃，夜间温度保持在10℃以上即可。
如果在温室或火炕上育苗，采用同样的方法，把装好营养土的塑料袋摆到温室中或火炕上，插条的方法和阳畦相同，仅是温室育苗开始时间可提前到l一2月。火炕育苗时，开始时间可稍迟一些。阳畦育苗时间可参考当地菜农育苗时间来决定，原则是苗子育成后定植时当地晚霜期已过，露地温度己适于苗木的生长。
扦插后的管理工作较为简单，主要是保持袋内适当的湿度，切忌袋中渍水。营养不足时，在长出2-3片叶后，可补喷1-3次0.3％尿素及磷酸二氢钾液。苗木长到20-25厘米时，大约5月中下旬即可在露地定植。
塑料营养袋育苗的优点是：①节约插条。②栽植时成活率高。塑料袋育成的苗木，根系发达，栽时去掉塑料袋后不散土、不伤根，栽植后不缓苗，苗木一直生长，成活率一般可达95％以上。③节省土地和劳力。采用露地扦插育苗，一般每666.7平方米出苗5000左右，而采用保护地塑料袋育苗，每666.7平方米可出苗10多万株。同时插后管理也较简单，只需浇水，不需中耕松土，并且起苗和假植、运输也很方便。④可提早结果。塑料袋育苗苗木5月即可定植，由于定植后无缓苗过程而且生长期相对延长，当年植株可以成形，*二年即可开始结果。
塑料营养袋育苗的关键是要注意控制水分。水分过多，会造成插条腐烂变质，所以要经常检查。在温室中进行塑料袋育苗时，温室的温度白天保持在25-30℃，较高不**过30℃，夜间温度不能低于15℃。
(2)火炕育苗 火炕育苗实际上是在火炕催根的基础上，直接把插条在火炕上培育成苗，然后定植到大田。
火炕的修筑和插条准备都同于火炕催根，仅插条扦插的密度没有催根的密度大，一般距4-5厘米扦插一个插条，插条2耀埋人湿沙中。全炕扦插完后，随时开始烧火加热，每天晚上和早上烧火2-3次，使床面沙内温度保持在25-30℃。同时注意经常洒水，保持床内湿润，气温较高时要及时揭开塑料薄膜通风。正常情况下，烧火时间大约需要1个月或1．5个月。进入大田定植前7-10天停止加热，对苗木进行适应性锻炼。一般扦插12天后即开始产生愈合组织，20天后生根率达70％，1个月后1个插条可长出10余条根，部分根已半木质化。这时地上部也可发出3-4片叶，苗高可达13-20厘米。实际应用中为了便于管理和取苗定植，常常采用营养钵或营养袋与火炕加温相结合的育苗方法。
火炕育苗省时间、省土地、省劳力、投资少、见效快、成苗率高，在无电力供应的农村可采用这种方法。
火炕育苗与电热育苗相同，实现了春季育苗、初夏栽植，延长了苗木的生长时间，创造了早成形、早结果、早丰产的条件。
火炕育苗时，火炕可在住宅院落里修建，也可在村头地边修建，节省了专门的育苗用地。
对于没有灌溉条件的地方，露地育苗常因水分供应不足而失败，而火炕育苗可使苗木集中，节约用水，同时管理也比教方便。因此，在干旱地区应推广这种集中育苗的方法。
(3)电热育苗 或电热催根温室育苗这种育苗方法实际上是在电热催根的基础上，把插条在电热温床上一直培育成苗或者电热催根后扦插到温室中育苗。因此，成苗率更高，苗木生长时间也长，一般比普通露地扦插能延长生长期2个月左右，容易达到当年壮苗，*二年结果的目的。
其做法基本上与前述的电热催根方法相同。
(4)地膜覆盖育苗 葡萄扦插前先用地膜覆盖苗床或育苗地垄，地膜四周用土压紧，扦插时先用较粗的带尖木棍在苗床上插个洞，然后将插条放入洞内，使其较上边的芽高出地面0.5厘米左右，插条下部扦插孔用土密封好，然后灌1次透水。
地膜的主要作用是提高地温，保持土壤水分，促进葡萄苗木的良好生长。覆盖地膜减少了土壤水分的蒸发，防止了土壤板结以及杂草的丛生，同时也减轻了复杂的苗圃管理工作。但要注意，当温度高时，覆膜会发生烧苗现象，这时要在地膜上覆盖草秸或及时揭掉地膜防止烧苗。